2013年1月20日 星期日

萊恩生物科技有限公司-銷售Non Liposome Transfection轉染試劑。將DNA與陽離子形成聚合型態分子。提高轉染效率且無細胞毒性。適用於貼附性/懸浮性細胞株，在血清下效果亦佳。




T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 轉染試劑，為一轉染效率高且低細胞毒性之真核細胞轉染試劑。T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 是藉由本身的陽離子與DNA形成聚合型態分子，來提昇轉染效率且不具細胞毒性。
T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 對各種不同的細胞株進行轉染測試，其中包括HEK293, 293T, 293E, BHK, CHO, COS1, COS7, HeLa, Vero, PC12, L929, NIH 3T3, Human Foreskin Fibroblasts (HFF) primary cells, Bovine Aorta Endothelial cells(BAEC), Sf9及Sf21等常用細胞株。此外，對其他各種真核細胞之細胞株進行轉染測試也有良好的效果。
此外T-Pro Non-liposome transfection Reagent II試劑,能有效將DNA, RNA, siRNA, oligonucleotides, ribonucleoprotein particles 及protein等實驗材料送入細胞且價格平易近人。可大幅降低生物醫學實驗室進行真核細胞轉染實驗之成本。
特性：
- 不具細胞毒性
- 在廣泛的細胞株測試中皆具有極佳的轉染效果
- 可在有血清環境下使用具有極佳的轉染效果
- 可產生大量的重組蛋白
- 操作步驟簡單快速
- 無論對於貼附性細胞或是懸浮性細胞皆具有極佳的轉染效果
操作指南：
哺乳動物細胞基因轉染的操作流程：
1.對於貼附型細胞
細胞之數量(見表1)：細胞應於轉染前18至24小時前培養，以確保細胞數量可以在轉染前密度達約40~90％之單層細胞狀態並於轉染前0.5-2小時前將細胞培養液更新。在轉染時，請使用含血清之細胞培養液，但於某些特殊情形下，可使用不含抗生素之無血清培養液或血清少於5％之培養液，可改善重組蛋白的表現量或有助於轉染之效果。
T-Pro Non-liposome transfection Reagent II -DNA複合物的製備和轉染操作步驟
1. 對於不同的細胞型態，T-Pro Non-liposome transfection Reagent II (μl)：DNA (μg)較佳的比例為1：1~4：1。在一開始時，我們採用的比例為2：1，且通常可以得到滿意的轉染效率且不具細胞毒性。在某些特殊狀況下，可嘗試改變混和比例以達到最佳轉染效果。為了確保混合物的最佳效果，我們建議採用不含血清及抗生素之細胞培養液或HBS buffer(pH7.4 150mM NaCl, 20mM HEPES) 對DNA及T-Pro Non-liposome transfection Reagent II進行稀釋。以下轉染操作流程適用於24孔細胞培養盤，其他培養盤之用量可依據其體積稍作調整，在表2有提及其他形式培養皿的轉染條件可供參考。
2. 以24孔細胞培養盤每孔為例，將1μg的DNA與30μl (不含血清及抗生素之細胞培養液)或HBS buffer(pH7.4 150mM NaCl, 20mM HEPES)混合。
3. 取2μl的T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 加入步驟2中DNA之混合物進行混合，經混合後於室溫下靜置15分鐘。
4. 再將步驟3之混合物均勻滴於盤內(含有細胞及血清培養液)，並以前後左右搖晃的方式使其均勻混合。
5. 將轉染後之細胞置於37℃含5％ CO2的培養箱中培養。
6. 經18至48小時後確認轉染及表現效率。
注意：若需轉染其他多孔盤或培養皿時，請將所需體積等比例放大或縮小。
2.對於懸浮細胞
細胞數量：懸浮細胞於轉染當天將細胞置換於新的培養液中並將其數量控制在0.5-1× 106 c ells/ml間。
T-Pro Non-liposome transfection Reagent II -DNA複合物的製備和轉染操作步驟
1. 對於不同的細胞型態，T-Pro Non-liposome transfection Reagent II (μl)：DNA (μg)較佳的比例為1：1~4：1。在一開始時，我們採用的比例為2：1，且通常可以得到滿意的轉染效率且不具細胞毒性。在某些特殊狀況下，可嘗試改變混和比例以達到最佳轉染效果。為了確保混合物的最佳效果，我們建議採用
不含血清及抗生素之細胞培養液或HBS buffer(pH7.4 150m M NaCl, 20m M HEPES)對DNA及T-Pro Non-liposome transfection Reagent II進行稀釋。以下轉染操作流程適用於24孔細胞培養盤，其他培養盤之用量可依據其體積稍作調整，在表2有提及其他形式培養皿的轉染條件可供參考。
2. 以24孔細胞培養盤每孔為例，將1μg的DNA與60μl (不含血清及抗生素之細胞培養液)或HBS buffer(pH7.4 150mM NaCl, 20mM HEPES)混合。
3. 取2μl的T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 加入步驟2中DNA之混合物進行混合，經混合後於室溫下靜置15分鐘。
4. 再將步驟3之混合物均勻滴於盤內(含有細胞及血清培養液)，並以前後左右搖晃的方式使其均勻混合。
5. 將轉染後之細胞置於37℃含5％ CO2的培養箱中培養。
6. 經18至48小時後確認轉染及表現效率。
注意：若需轉染其他多孔盤或培養皿時，請將所需體積等比例放大或縮小。
T-Pro Non-liposome transfection Reagent II -siRNA複合物的製備和轉染操作步驟
1. 對於不同的細胞型態，T-Pro Non-liposome transfection Reagent II (μL)：siRNA (μg)較佳的比例為1：1~4：1。在一開始時，我們採用的比例為3：1，且通常可以得到滿意的轉染效率且不具細胞毒性。在某些特殊狀況下，可嘗試改變混和比例以達到最佳轉染效果。為了確保混合物的最佳效果，我們建議採用不含血清及抗生素之細胞培養液或HBS buffer(pH7.4 150mM NaCl, 20mM HEPES)對T-Pro Non-liposome transfection Reagent
II進行稀釋。以下轉染操作流程適用於24孔細胞培養盤，其他培養盤之用量可依據其體積稍作調整，在表2有提及其他形式培養皿的轉染條件可供參考。
2. 以24孔細胞培養盤每孔為例，取30μl (不含血清及抗生素)細胞培養液或HBS buffer(pH7.4 150mM NaCl, 20mM HEPES)。
3. 取siRNA 5~50 nmol 加入到步驟2中均勻混合。
4. 取T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 1~5μl 加入到步驟3中siRNA之混合物均勻混合，經混合後於室溫下靜置15分鐘。
5. 將步驟4之混合物取均勻滴於盤內(含有細胞及血清培養液)，並以前後左右搖晃的方式使其均勻混合。
6. 將轉染後之細胞置於37℃含5％ CO2的培養箱中培養。
7. 經18至48小時後確認轉染及表現效率。
注意：若需轉染其他多孔盤或培養皿時，請將所需體積等比例放大或縮小。
注意：siRNA溶液濃度，需在1μM 以上使用。


【供應廠商】萊恩生物科技有限公司
【公司電話】04-2523-9639
【業務專員】陳俊豪 0937-229803
【電子信箱】biolion0819@gmail.com

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ABMgood G288 Protein transfection reagent蛋白質轉染試劑【萊恩生物科技有限公司】ABMgood代理




加拿大ABMgood www.abmgood.com
蛋白質轉染試劑
隨著分子生物學和細胞生物學的快速發展，DNA轉染已經逐步不能滿足科研的需要，直接轉染蛋白質進入細胞不僅節省時間，而且還可以更便捷的應用於活性蛋白和胜肽細胞內相互作用、胜肽庫篩選以及蛋白質半衰期研究等。
Proteinfectin有效將蛋白質送入哺乳類細胞。特定蛋白質效果的最快速方法就是把蛋白質直接轉染到細胞的內部。蛋白質送入細胞中，可以探討蛋白質間交互作用、蛋白質翻轉、細胞訊息途徑、 凋亡途徑和轉錄因子調節基因調控等研究。
在某些幹細胞研究中，直接轉染蛋白也具有意想不到的效果。Proteinfectin 蛋白質高效轉染試劑由一套獨特的基於陽離子脂類的載體系統組成，可用於將生物學上有活性的蛋白質，胜肽片段或抗體導入活細胞內。轉染試劑-蛋白質絡合物貼附在帶負電荷細胞表面並通過直接與細胞膜融合或胞噬作用及隨後的與內涵體融合，將capture的蛋白質釋放入細胞質中而進入細胞。
Proteinfectin 蛋白質高效轉染試劑，轉染分子量從小分子多胜肽到超過550kDa的蛋白質皆有不錯的效果。由於形成的絡合物是非共價的，因此不會干擾蛋白質的生物學活性。
位於加拿大的ABM（Applied Biological Materials, Inc.）是前沿生命科學研究和藥物篩選方案前沿供應商。ABM為全球科研客戶提供最具價格優勢的高品質產品，包括RT-PCR試劑、抗體, siRNA產品, 細胞immortalize, 腺病毒和慢病毒全系列產品以及幹細胞等相關產品以及定製化服務


Description
ABM’s Proteinfectin™ Transfection Reagent comprises of lipid formulations which will mediate the transport of intact functional proteins across the cell membrane via non-covalent complexes. ABM’s Proteinfectin™ Transfection Reagent can co-deliver multiple proteins ranging from small peptides to large proteins greater than 550kDa. High delivery efficiency have been observed when delivering diverse proteins (ie. active enzymes and antibodies) with the help of Proteinfectin™ into a variety of cell types including primary cells. This transfection reagent is perfect for any of your protein transfection needs.
Application
Delivery of diverse functionally active proteins and peptides into cultured eukaryotic cells, study protein interactions in living cells, screening peptide libraries, and protein half-life studies.




【供應廠商】萊恩生物科技有限公司
【公司電話】04-2523-9639
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【萊恩生物科技有限公司】T-Pro NTR I. T-Pro NTR II Transfection reagent高效能轉染試劑。台灣總代理經銷商。

T-Pro NTR I. T-Pro NTR II Transfection reagent高效能轉染試劑。台灣總代理經銷商-non liposomal transfection reagnet。
T-Pro NTR I (non-liposomal transfection reagent I)

T-Pro NTR II (non-liposomal transfection reagent II)

簡介：

T-Pro Non-liposome Transfection Reagent轉染試劑，為一轉染效率高且不具細胞毒性的細胞轉染試劑。T-Pro Non-liposome Transfection Reagent是藉由將DNA與陽離子的non-liposome形成聚合型態分子，來提昇轉染效率且不具細胞毒性。
T-Pro Non-liposome Transfection Reagent 以對各種不同的細胞株進行轉染測試，其中包括HEK293, 293T, 293E, BHK, CHO, COS1, COS7, HeLa, Vero, PC3, L929, NIH 3T3, Human Foreskin Fibroblasts (HFF) primary cells, Bovine Aorta Endothelial cells(BAEC), Sf9及Sf21等常用細胞株。此外，對其他各種真核細胞之細胞株進行轉染測試也有良好的效果。
此外T-Pro Non-liposome Transfection Reagent 試劑,能有效地將DNA, RNA, siRNA, oligonucleotides, ribonucleoprotein particles 及protein等實驗材料送入細胞且價格平易近人。可大幅降低生物醫學實驗室進行細胞轉染實驗的成本。
特性：
l 不具細胞毒性。
l 操作步驟簡單快速。
l 在廣泛的細胞株測試中皆具有良好的轉染效果。
l 可在有血清環境下使用且具有良好的轉染效果。
l 可產生大量的重組蛋白。
l 無論對於貼附性細胞或是懸浮性細胞皆具有良好的轉染效果。

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(NEW) Transfection Reagent (in vivo) 體內轉殖試劑 【萊恩生物科技有限公司】台灣代理商

T-Pro G - Fect（體內）轉殖試劑

T-Pro G - Fect（體內）轉殖試劑是帶有陽離子的無菌溶液，因其帶正電可與DNA形成穩定的複合物。在生物體內進行基因轉殖的過程中，此複合物的型態可保護DNA不受降解，同時使轉殖的過程更容易。傳送DNA的過程可通過各種途徑，包括靜脈注射，腹腔，腫瘤內注射等，而試劑在這樣的使用過程中並未檢測到發炎反應的產生。


試劑提供：
Reagent A或使用無菌 5％W/ V葡萄糖溶液代替做為稀釋的DNA之用。

一般注意事項:DNA的品質要求 DNA的品質是轉殖是否成功的重要關鍵。建議A260/A280比值1.8或者更高。同時DNA應該是無菌的，且不具任何污染物，如內毒素。
選擇啟動子(promoter)
 在標的組織 /器官中，高目標基因表現量取決於啟動子與目標基因的選用。巨細胞病毒（CMV）啟動子是最常使用於各類細胞中。但有些研究也常使用LTR，（SV40）或（RSV）作為啟動子(promoter)。

轉殖試劑 / DNA比率：轉殖試劑的使用量取決於DNA的量，轉殖基因使用量和被轉殖動物的比率可先參照(表1)。再依據結果加以調整取得最佳效果。
DNA注射建議量：DNA注射量，取決於所使用實驗動物的種類和注射方式（見表 1），以及標的組織或器官。

為了避免T-Pro G - Fect（in vivo）/ DNA複合物沉澱，建議注射DNA的最終濃度不應超過0.5μg/μl。
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Transfection Reagent (non-liposomal)非微脂囊式轉染試劑 【萊恩生物科技有限公司】



Transfection Reagent (non-liposomal)非微脂囊式轉染試劑



特性：
- 不具細胞毒性
- 在廣泛的細胞株測試中皆具有極佳的轉染效果
- 可在有血清環境下使用具有極佳的轉染效果
- 可產生大量的重組蛋白
- 操作步驟簡單快速
- 無論對於貼附性細胞或是懸浮性細胞皆具有極佳的轉染效果
產品介紹
T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 轉染試劑，為一轉染效率高且低細胞毒性之真核細胞轉染試劑。T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 是藉由本身的陽離子與DNA形成聚合型態分子，來提昇轉染效率且不具細胞毒性。
不同細胞轉染效率
T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 對各種不同的細胞株進行轉染測試，其中包括HEK293, 293T, 293E, BHK, CHO, COS1, COS7, HeLa, Vero, PC12, L929, NIH 3T3, Human Foreskin Fibroblasts (HFF) primary cells, Bovine Aorta Endothelial cells(BAEC), Sf9及Sf21等常用細胞株。此外，對其他各種真核細胞之細胞株進行轉染測試也有良好的效果。
此外T-Pro Non-liposome transfection Reagent II試劑,能有效將DNA, RNA, siRNA, oligonucleotides, ribonucleoprotein particles 及protein等實驗材料送入細胞且價格平易近人。可大幅降低生物醫學實驗室進行真核細胞轉染實驗之成本。

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RNAi專用的轉染試劑,RNAifectin™ Transfection Reagent, G073 【萊恩生物科技有限公司04-25239639】abmgood台灣總代理



RNAi專用的轉染試劑
RNAifectin™ Transfection Reagent, G073
【萊恩生物科技有限公司04-25239639】abmgood台灣總代理

Cat.No.:G073
Quantity:1.0ml (100-500 transfections)

Description
Escpecially developed for the efficient transfection of eukaryotic cells with RNAi oligo's. This transfection reagent is perfect for any of your RNAi transfection needs.
Application
RNAi knockdown experiments in a wide variety of cell lines (HeLa, HEK-293 etc). Highly specific and non-toxic transfection.
Protocol

Storage
Store at 4ºC. Do not freeze.
Notes
This product is distributed for laboratory research only. Caution: Not for diagnostic use .

產品介紹 Description
ANAifectin™ is a transfection reagent specially formulated with multiple cationic polymers. It is suitable for the transfection of RNAi oligoes into cultured eukaryotic cells.
RNAi轉染操件手冊:
These conditions are recommended as guidelinesonly. A 6-well or 35mm dish is adequate for most applications, but larger vessels are sometimes required. In that case, consult table 1.

1. In a 6-well plate, seed cells at a density of 1-3x10⁵ per well in 2.0ml of the appropriate
growth medium (with serum if cells are cultured in presence of serum). Incubate the cells at 37°C until cells are 60-90% confluent. This will usually take 18-24 hours, depending on cell types. Since transfection efficiency is sensitive to culture confluence, it is important to maintain a standard seeding protocol from experiment to experiment
2. Prepare the following solutions in sterile 12x75 mm or microcentrifuge tubes: Solution A: For each transfection, dilute 1-3μg of RNAi oligoes into 125μl serum-free
medium. Solution B: For each transfection, dilute 4-10μl of
RNAifectin™ reagent into 125μl of serum-free medium. (Vortex RNAifectin™ reagent before use)
3. Combine the solutions, mix thoroughly and incubate at room temperature for 20 mins to
allow DNA-lipsome complexes to form.
4. Remove growth medium from the cells and add 800μl of serum-free medium to the cells.
5. Add the RNAifectin™-oligo complexes to thecells, mix gently to ensure uniform distribution
and incubate at 37°C for 2-24 hours. We recommend starting with 5 hours.
6. Remove the transfection solution and add 2.0ml of the appropriate complete growth medium(with serum) to each well. Incubate cells at 37°Cfor a total of 24-72 hours.
7. Assay cell extracts for gene activity 24-72 hours a􀄞er the start of transfection depending on the cell types and promoter activity.
8. A similar procedure can be used to transfect an RNAi vector for stable expression. At 72 hours after transfection, split the cells at a ratio of 1:10 into the selective medium for the marker gene transfected.
 
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【JT97-N002S NTRII 轉染試劑產品】T-Pro Biotechnology 建立1992年，提供適用於一般細胞株的 Transfection reagent。台灣區代理太鼎生物科技。




【Transfection 如何省經費?】
NTRII 轉染試劑產品 (NTRII, #JT97-N002S)，具有高效能、低價位及高品質等特點。其價格為一般市售商品的1/3~1/5倍，因為適用於大部份的細胞株 (效能如下所示)，所以廣受研究單位所使用。其使用的比例較PJ牌為低，用量很省，一般的細胞株其用量為1ug DNA: 2ul NTRII。因其毒性比Liposome低，因此更適用於primary cell。建議客戶使用便宜的NTRII來轉染細胞株。遇見難以轉染的細胞株，例如巨噬細胞、肌肉細胞、心肌細胞，再用高價位的轉染試劑，或是病毒等方式來進行。此產品在中研院、國衛院、台大等單位都一直使用。若須試用品100ul試用,請洽各區域業務。
LentiVirus病毒蛋白於293T細胞株的產製，應用傳統方式，以10公分培養基，須要10ugDNA的濃度。中研院客戶使用NTRII轉染包裝載體於293T細胞株，每10分培養基，只須4ug的DNA用量。應用NTRII轉染試劑來表現Lentivirus蛋白，其方法簡單、DNA用量少、具有高病毒蛋白的表現量。
【轉染試劑產品介紹】
T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 對各種不同的細胞株進行轉染測試，其效果都很好。其中包括肝癌細胞HepG2、Huh7; 乳癌細胞株MCF7; 神經細胞株N 2A ; HEK293, 293T, 293E, BHK, CHO懸浮或貼附, COS1, COS7, HeLa, Vero, L929, NIH 3T3, Human Foreskin Fibroblasts (HFF) primary cells, Bovine Aorta Endothelial cells(BAEC), Sf9及Sf21昆虫等常用細胞株。
【NTRII產品特點】
- 不具細胞毒性 ----更適用於Primary cell。
- 在廣泛的細胞株測試中皆具有極佳的轉染效果 -----好轉的細胞株，就用便宜的轉染試劑。
- 可在有血清環境下使用具有極佳的轉染效果 ----不須6小時後更換medium
- 可產生大量的重組蛋白 ------Lentivirus病毒產製，10公分dish只須4ug DNA: 10ul NTRII
- 操作步驟簡單快速 ----比Lipofetamin2000簡單
- 無論對於貼附性細胞或是懸浮性細胞皆具有極佳的轉染效果
【操作指南】
哺乳動物細胞基因轉染的操作流程：
1.對於貼附型細胞
細胞之數量(見表1)：細胞應於轉染前18至24小時前培養，以確保細胞數量可以在轉染前密度達約40~90％之單層
細胞狀態並於轉染前0.5-2小時前將細胞培養液更新。在轉染時，請使用含血清之細胞培養液，但於某些特殊情形下，
可使用不含抗生素之無血清培養液或血清少於5％之培養液，可改善重組蛋白的表現量或有助於轉染之效果。
T-Pro Non-liposome transfection Reagent II -DNA複合物的製備和轉染操作步驟
1. 對於不同的細胞型態，T-Pro Non-liposome transfection Reagent II (μl)：DNA (μg)較佳的比例為1：1~4：1。
在一開始時，我們採用的比例為2：1，且通常可以得到滿意的轉染效率且不具細胞毒性。在某些特殊狀況下，可嘗試改變混
和比例以達到最佳轉染效果。為了確保混合物的最佳效果，我們建議採用不含血清及抗生素之細胞培養液或HBS buffer
(pH7.4 150m M NaCl, 20m M HEPES) 對DNA及T-Pro Non-liposome transfection Reagent II進行稀釋。以下轉染操作
流程適用於24孔細胞培養盤，其他培養盤之用量可依據其體積稍作調整，在表2有提及其他形式培養皿的轉染條件可供參考。
2. 以24孔細胞培養盤每孔為例，將1μg的DNA與30μl (不含血清及抗生素之細胞培養液)或HBS buffer
(pH7.4 150mM NaCl, 20mM HEPES)混合。
3. 取2μl的T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 加入步驟2中DNA之混合物進行混合，經混合後於室溫下靜置15分鐘。
4. 再將步驟3之混合物均勻滴於盤內(含有細胞及血清培養液)，並以前後左右搖晃的方式使其均勻混合。
5. 將轉染後之細胞置於37℃ 含5％ CO2的培養箱中培養。
6. 經18至48小時後確認轉染及表現效率。
注意：若需轉染其他多孔盤或培養皿時，請將所需體積等比例放大或縮小。
2.對於懸浮細胞
細胞數量：懸浮細胞於轉染當天將細胞置換於新的培養液中並將其數量控制在0.5-1× 106 c ells/ml間。
T-Pro Non-liposome transfection Reagent II -DNA複合物的製備和轉染操作步驟
1. 對於不同的細胞型態，T-Pro Non-liposome transfection Reagent II (μl)：DNA (μg)較佳的比例為1：1~4：1。在一開始時，我們採用的比例為2：1，且通常可以得到滿意的轉染效率且不具細胞毒性。在某些特殊狀況下，可嘗試改變混和比例以達到最佳轉染效果。為了確保混合物的最佳效果，我們建議採用
不含血清及抗生素之細胞培養液或HBS buffer(pH7.4 150m M NaCl, 20m M HEPES)對DNA及T-Pro Non-liposome transfection Reagent II進行稀釋。以下轉染操作流程適用於24孔細胞培養盤，其他培養盤之用量可依據其體積稍作調整，在表2有提及其他形式培養皿的轉染條件可供參考。
2. 以24孔細胞培養盤每孔為例，將1μg的DNA與60μl (不含血清及抗生素之細胞培養液)或HBS buffer(pH7.4 150mM NaCl, 20mM HEPES)混合。
3. 取2μl的T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 加入步驟2中DNA之混合物進行混合，經混合後於室溫下靜置15分鐘。
4. 再將步驟3之混合物均勻滴於盤內(含有細胞及血清培養液)，並以前後左右搖晃的方式使其均勻混合。
5. 將轉染後之細胞置於37℃ 含5％ CO2的培養箱中培養。
6. 經18至48小時後確認轉染及表現效率。
注意：若需轉染其他多孔盤或培養皿時，請將所需體積等比例放大或縮小。\
T-Pro Non-liposome transfection Reagent II -siRNA複合物的製備和轉染操作步驟
1. 對於不同的細胞型態，T-Pro Non-liposome transfection Reagent II (μL)：siRNA (μg)較佳的比例為1：1~4：1。在一開始時，我們採用的比例為3：1，且通常可以得到滿意的轉染效率且不具細胞毒性。在某些特殊狀況下，可嘗試改變混和比例以達到最佳轉染效果。為了確保混合物的最佳效果，我們建議採用不含血清及抗生素之細胞培養液或HBS buffer(pH7.4 150m M NaCl, 20m M HEPES)對T-Pro Non-liposome transfection Reagent II進行稀釋。以下轉染操作流程適用於24孔細胞培養盤，其他培養盤之用量可依據其體積稍作調整，在表2有提及其他形式培養皿的轉染條件可供參考。
2. 以24孔細胞培養盤每孔為例，取30μl (不含血清及抗生素)細胞培養液或HBS buffer(pH7.4 150mM NaCl, 20mM HEPES)。
3. 取siRNA 5~50 nmol 加入到步驟2中均勻混合。
4. 取T-Pro Non-liposome transfection Reagent II 1~5μl 加入到步驟3中siRNA之混合物均勻混合，經混合後於室溫下靜置15分鐘。
5. 將步驟4之混合物取均勻滴於盤內(含有細胞及血清培養液)，並以前後左右搖晃的方式使其均勻混合。
6. 將轉染後之細胞置於37℃ 含5％ CO2的培養箱中培養。
7. 經18至48小時後確認轉染及表現效率。
注意：若需轉染其他多孔盤或培養皿時，請將所需體積等比例放大或縮小。
注意：siRNA溶液濃度，需在1μM 以上使用。
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T-Pro Mounting Reagent or Mounting Long Reagent 高效能螢光抗退色劑，讓螢光不衰退。延長螢光於螢光顯微鏡之觀察時間，不會產生光漂白之現象。

T-Pro Mounting Reagent or T-Pro Mounting Long Reagent 是一種高效性抗退色試劑，可使用於免疫螢光染色樣品之觀察。此一高效性抗退色試劑可幫助螢光樣品抵抗於螢光顯微鏡下觀察時所產生之光漂白現象。
本產品之使用能適用於各種螢光染劑或抗體。並且使用本產品不但能使螢光樣品之觀察時間增長進而增加實驗成功率更可增加樣品保存期限至最多1星期。
特性：
• 使用前請將“T-Pro Mounting Reagent or T-Pro Mounting Long Reagent ”回溫至室溫。
• 在使用“T-Pro Mounting Reagent or T-Pro Mounting Long Reagent ”前請盡量去除樣品上殘留之液體。
• “T-Pro Mounting Reagent or T-Pro Mounting Long Reagent ”適用於大多數樣品於差異干擾差、相位差或螢光顯微鏡下觀察。
操作：
1.回溫試劑：
將“T-Pro Mounting Reagent or T-Pro Mounting Long Reagent ”自4oC 冰箱中取出並回溫至室溫備用。請勿將“T-Pro Mounting Reagent or T-Pro Mounting Long Reagent ”以溫水或其他加熱方式回溫，以免破壞產品穩定性。
2.使用Apply T-Pro Mounting Reagent or T-Pro Mounting Long Reagent ：
在使用“T-Pro Mounting Reagent or T-Pro Mounting Long Reagent ”前請將樣品玻片上之殘留液體以拭鏡紙由玻片邊緣輕輕去除並在玻片上滴上一滴“T-Pro Mounting Reagent or T-Pro Mounting Long Reagent ”（10-20ul）。將樣品蓋玻片以45度角，緩慢的蓋在含有“T-Pro Mounting Reagent or T-Pro Mounting Long Reagent ”之載玻片上，其間請避免氣泡之產生。
3.上機前準備
樣品玻片完成步驟二之製備後，請避光保存於4oC冰箱中並請注意保存時表面之平坦。保存期限則因樣品的不同而有所差異，自數小時至隔夜不等，同時也受到儲存環境中溫濕度的影響。如需較長時間保存，建議將樣品玻片以指甲油封片，並避光保存於4oC冰箱中。必要時，保存盒內可放置乾燥劑以維持儲存環境之乾燥。
圖1. T-Pro Mounting Long Reagent I 有幫助螢光分子抵抗光漂白之效果。圖1.a NIH 3T3細胞以4％福馬林固定後再以Fluorescein-phalloidin對細胞骨架進行染色。 圖中影像乃是將染色完成之樣品置於T-Pro Mounting Long Reagent I或PBS中，並在封片後以100瓦汞燈對樣品進行不同時間之照射以產生光漂白之效果，再以63x/1.4 NA 油鏡及16-bit 單色 CCD攝影機在相同條件下進行拍攝。在所得影像中可清楚得知於PBS對照組中，在螢光照射120秒以後，絕大部分之螢光分子因光漂白而無法呈色，而在實驗組中發現T-Pro Mounting Long Reagent I能幫助螢光分子抵抗光漂白，直至螢光照射7分鐘後，大部分之螢光分子才因光漂白而無法呈色，因此說明了T-Pro Mounting Long Reagent I有幫助螢光分子抵抗光漂白之效果。並將兩組實驗在不同時間所取得之影像，以軟體對螢光衰減率進行分析後所做之圖。

下圖、以T-Pro Mounting Long Reagent I with DAPI、Alexa Fluo 488 phalloidin及Alexa Fluo 594 wheat germ agglutinin對NIH 3T3細胞進行染色之成果。
【供應廠商】萊恩生物科技有限公司
【公司電話】04-2523-9639
【業務專員】陳俊豪 0937-229803
【電子信箱】biolion0819@gmail.com
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